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技術(shù)文章

2020
5-26

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)該如何加樣和溫育？
ELISA試劑盒具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在一、二孔平分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在一、二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從一孔、二孔中各取100μl分別加到三孔和四孔，再在三、四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在三孔和四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分...
2020
5-15

轉(zhuǎn)基因生物觀測(cè)鏡的工作原理及用途
轉(zhuǎn)基因生物觀測(cè)鏡通過(guò)發(fā)藍(lán)色光源照射色綠熒光蛋白，會(huì)激發(fā)出綠色熒光;濾光鏡擋住所有反射光，只允許相應(yīng)熒光通過(guò)，從而能觀測(cè)到目標(biāo)物。一、轉(zhuǎn)基因生物觀測(cè)鏡的產(chǎn)品用途：1.檢測(cè)轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白（GFP）基因、紅色熒光蛋白（DsRed）基因植物：水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥等；2.檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因動(dòng)物：小鼠、兔子、猴子等；3.檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因微生物：細(xì)菌、真菌、酵母等；4.檢測(cè)GFP、DsRed基因組織特異性表達(dá)。二、工作原理：藍(lán)色光源照射色綠熒光蛋白（G...
2020
4-27

了解這些，教您輕松鑒別ELISA試劑盒的真假！
準(zhǔn)確度高是ELISA試劑盒試驗(yàn)的主要優(yōu)勢(shì)之一，當(dāng)ELISA試劑盒同一樣本達(dá)必定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù)，其中靠近均值(X)的±1SD范圍內(nèi)的數(shù)據(jù)，占該組數(shù)據(jù)的68%，在X±2SD范圍內(nèi)散布的數(shù)據(jù)占整體的95%，在X±3SD范圍內(nèi)散布的數(shù)據(jù)占整體的99%。當(dāng)我們要求檢驗(yàn)結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合格時(shí)，將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。準(zhǔn)確度是指測(cè)定結(jié)果與真值(或靶值)挨近的程度。準(zhǔn)確度不能以數(shù)字表明，往往用不準(zhǔn)確度來(lái)衡量。測(cè)定結(jié)果與靶...
2020
4-15

實(shí)驗(yàn)人員*的ELISA試劑盒操作技巧！
ELISA試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA試劑盒的操作技巧：1.準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等；2.根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量；3.按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑；4.標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存。實(shí)驗(yàn)中為了確定較佳信號(hào)和背景應(yīng)將捕獲...
2020
3-25

哪些情況會(huì)導(dǎo)致ELISA試劑盒酶標(biāo)板失效？
ELISA試劑盒的保質(zhì)期通常都是在一年，假設(shè)保存妥當(dāng)?shù)脑挘粫?huì)出現(xiàn)疑問(wèn)的。但不要重復(fù)凍融。當(dāng)然假設(shè)是正常的DAS-ELISA查看試劑盒等，應(yīng)當(dāng)放在4℃支配冰箱保存。建議ELISA試劑盒凍結(jié)后一次用完。已開(kāi)封或許運(yùn)用后，剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，ELISA查看試劑盒開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免濕潤(rùn)。但要留心的是，假設(shè)將ELISA試劑盒剛從冰箱里邊拿出來(lái)就當(dāng)即運(yùn)用的話，也許會(huì)影響，其直接的效果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的查看出現(xiàn)假陰性。建議：先從冰箱...
2020
3-13

如何改進(jìn)ELISA試劑盒試驗(yàn)中的錯(cuò)誤？
ELISA試劑盒有許多試驗(yàn)操作步驟，新手操作難免犯錯(cuò)。其中許多過(guò)錯(cuò)是由不充分的細(xì)節(jié)造成的。有很多方法可以減少這種過(guò)錯(cuò)，比方在做試驗(yàn)時(shí)少說(shuō)話，以防止唾液掉進(jìn)酶的標(biāo)簽中。當(dāng)然，我們也要學(xué)會(huì)探索自己的問(wèn)題，找出原因。那么，我們?cè)趺锤纳艵LISA試劑盒試驗(yàn)中的過(guò)錯(cuò)呢，下面我們來(lái)仔細(xì)說(shuō)說(shuō)。1、點(diǎn)評(píng)試劑的實(shí)用性試劑的穩(wěn)定性對(duì)準(zhǔn)確度非常重要。在啟用ELISA試劑盒之前，應(yīng)重復(fù)檢測(cè)陰性和陽(yáng)性對(duì)照品和樣品，試劑僅在試劑符合要求后才能運(yùn)用。2、操作前仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格依照說(shuō)明書(shū)要...
2020
1-23

什么因素會(huì)影響ELISA試劑盒的質(zhì)保？
影響ELISA試劑盒質(zhì)保的因素：1.辦法學(xué)的影響ELISA測(cè)定形式包含以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法，其間競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時(shí)差所引起的競(jìng)爭(zhēng)等要素的影響，成果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難操控。2.試劑要素不同批次的ELISA試劑在制作進(jìn)程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)成果也存在差異，因而必須挑選和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑，并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因試劑批號(hào)改動(dòng)而從頭建立質(zhì)控體系及從...
2020
1-16

ELISA試劑盒吸光度值衰減該如何處理？
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。在進(jìn)行ELISA試劑盒試驗(yàn)時(shí),有人會(huì)問(wèn)發(fā)現(xiàn),ELISA試劑盒吸光度值衰減，為了能更好地處理這一問(wèn)題，我們得現(xiàn)了解什么是Elisa試劑盒吸光度值衰減，就是指加完顯色液(購(gòu)買(mǎi))顯色一定時(shí)間后,再加終止液（2MH2SO4,自己配制）后,立即測(cè)試其吸...
2019
12-25

ELISA試劑盒在冬季應(yīng)如何保存？
ELISA試劑盒在冬季的保存方法：1.要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有相似過(guò)氧化物的活性，因而，在以HRP為符號(hào)酶的ELISA試劑盒測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡(jiǎn)單在溫育進(jìn)程中吸附于固相，然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。2.樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的成長(zhǎng)，其所排泄的一些酶或許會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用；二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作符號(hào)的測(cè)定辦法發(fā)生非特異性攪擾。...
2019
10-26

ELISA試劑盒試驗(yàn)中常用到的封閉液配置方法
ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)中的封閉液小知識(shí)：ELISA試劑盒說(shuō)明上寫(xiě)封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點(diǎn)，蔗糖封閉的原理：1、elisa實(shí)驗(yàn)中，蔗糖本身沒(méi)有封閉作用;2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。3、加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護(hù)劑”的作用。4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過(guò)BSA封閉后加，當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時(shí)進(jìn)行處理;那一種更好需要你實(shí)驗(yàn)后來(lái)驗(yàn)證。但多數(shù)選擇前者。封閉劑還可用5%的脫...

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